Omdat eiwitpeptidegeneesmiddelen meestal bioactieve stoffen zijn

Omdat eiwitpeptidegeneesmiddelen meestal bioactieve stoffen zijn en de biologische activiteit niet alleen afhangt van de primaire structuur van het medicijn, maar ook nauw verwant is aan de secundaire en tertiaire structuren, is bioassay een unieke en noodzakelijke methode om de farmacokinetiek van deze klasse te bestuderen. Bioassays hebben twee doelen: het direct bepalen van de geneesmiddelconcentraties in lichaamsvloeistoffen en het identificeren van de biologische activiteit van gelabelde geneesmiddelen. De methoden kunnen worden onderverdeeld in twee hoofdcategorieën.
1.1.1 In vivo analyse Conventionele bloedglucosemethode bij muizen met insuline, enz., naast verschillende methoden vastgesteld op basis van de biologische activiteit van verschillende soorten eiwitpolypeptiden, zoals IL-8 mobilisatie-neutrofielen in konijnenexperimenten vastgesteld volgens vanwege de aard van IL-8 kan een groot aantal neutrofielen uit bot mobiliseren [1]. Dit type methode weerspiegelt het meest intuïtief de biologische activiteit, maar omvat het hele dier, is tijdrovend en arbeidsintensief, heeft een lage gevoeligheid en kent een grote variatie.
1.1.2 In vivo weefsel (cel) analyse zoals NGF stimuleert de groei van dorsale wortelganglia van kippen, oxytocine in de ex vivo baarmoedermethode van ratten, enz. Met de ontwikkeling van de moleculaire biologie zijn er veel specifieke en gevoelige afhankelijke cellijnen vastgesteld, en celcultuur is de meest gebruikelijke methode geworden. Volgens de verschillende mechanismen van eiwitpeptide-interactie met cellen zijn er veel specifieke operaties. Zoals proliferatietests, die snel en gevoelig zijn, maar iets minder specifiek; Zoals bij antiproliferatie het geval is, is het detectiesysteem eenvoudig, gevoelig en specifiek; Cytopathische effectreductietests [2], gebaseerd op geneesmiddelen met antivirale activiteit zoals interferon, beschermen cellen tegen virale schade. De methode is intuïtief en gevoelig, maar kan worden verstoord door peptidesubtypen. De bovenstaande methoden zijn gebaseerd op de toename en afname van het aantal cellen als kwantitatieve en effectieve indicatoren, en de telmethoden omvatten de directe telmethode en de indirecte telmethode, de laatste omvat de MTT-methode, isotoop (3H, 14C) opnamemethode, enz. Daarnaast zijn er tests gebaseerd op de indirecte interactie van eiwitpolypeptiden met cellen, zoals de antilichaaminductiemethode gecombineerd met immunodetectie [3], enzymgeïnduceerde ontledingsmethode gecombineerd met enzymreactie [4] enzovoort. Over het algemeen hebben celkweekmethoden de voordelen van gevoeligheid en specificiteit, objectiviteit en betrouwbaarheid, maar hun tekortkomingen zijn ook duidelijk. Ten eerste kunnen bioassays inactieve kleine metabolieten niet kwantificeren en hun dynamiek in vivo niet traceren; Ten tweede bestaan ​​de monsters meestal uit menselijk of dierlijk serum, en de interferentie van endogene stoffen in serum en de kruisreactie van mogelijke endogene factoren beïnvloeden de specificiteit van de methode. Bovendien zijn drempelcytokinen vaak nodig om biologische processen te initiëren, wat de gevoeligheid van de methode vermindert; Langdurige kweek van afhankelijke stamcellen is vatbaar voor mutaties die de specificiteit van de test beïnvloeden.